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解決方案

Matrix Builder基質噴涂儀介紹

Matrix Builder基質噴涂儀,采用電噴霧基質噴涂技術精確控制基質結晶大小,保障了更細膩,更均一的基質噴涂效果。基質結晶最小可達5 μm。主要用于MALDI-MSI、DESI-MSI、AFADESI-MSI質譜成像實驗的組織樣品制備環節,用于幫助提高質譜成像的信號強度和分辨率,也可用于納米材料噴涂、胰酶噴涂、原位衍生化等實驗。目前在脂質組學、蛋白質組學、環境毒理、空間代謝組學等領域具有非常好的使用場景。

Matrix Builder基質噴涂實驗案例展示

研究目的

腦組織微區具有特異性。利用MALDI MSI觀察微區脂質等代謝小分子分布。

實驗方案設計

采用Matrix Builder基質噴涂儀,DHB基質(20 mg/mL DHB,溶劑:乙腈/水=8/2),布魯克MALDI-FTICR MSI質譜進行實驗。

具體參數如下:

(1)基質噴涂儀實驗參數如下:循環次數為8次;泵速為0.07 mL/min;掃描間距為2 mm;噴嘴溫度為 50℃;噴霧壓力為0.55 MPa;干燥時間為8 s;噴霧電壓為 0 V;基質濃度為20mg/mL;噴嘴速度為 30 mm/s;掃描方式為橫向掃描;載波臺溫度為45℃;保持時間為30 s;噴嘴高度為12 mm。

(2)MALDI-FTICR質譜分析采用Bruker SolariX質譜儀。使用NaTFA對實驗儀器進行外部校標。具體的實驗參數如下:Plate offset為100 V;Deflector Plate為180 V;Laser Shots為150 V;Laser Power為65%;Frequency為150 Hz;Laser Focus為medium;步長為100 μm。數據處理使用FlexImaging 5.0軟件(Bruker Daltonics)

實驗結果

圖1:質譜數據圖。由圖可見,大量的脂質分子可以被檢測到。


圖2:分子成像圖,腦微區分子分布有清晰界限

實驗方案

采用Matrix Builder基質噴涂儀,DHB基質,布魯克MALDI-FTICR MSI質譜進行實驗。

實驗方案設計

采用Matrix Builder基質噴涂儀,DHB基質(20 mg/mL DHB,溶劑:乙腈/水=8/2),布魯克MALDI-FTICR MSI質譜進行實驗。

具體參數如下:

(1)基質噴涂儀實驗參數如下:循環次數為8次;泵速為0.07 mL/min;掃描間距為2 mm;噴嘴溫度為 50℃;噴霧壓力為0.55 MPa;干燥時間為8 s;噴霧電壓為 0 V;基質濃度為20mg/mL;噴嘴速度為 30 mm/s;掃描方式為橫向掃描;載波臺溫度為45℃;保持時間為30 s;噴嘴高度為12 mm。

(2)MALDI-FTICR質譜分析采用Bruker SolariX質譜儀。使用NaTFA對實驗儀器進行外部校標。具體的實驗參數如下:Plate offset為100 V;Deflector Plate為180 V;Laser Shots為150 V;Laser Power為65%;Frequency為150 Hz;Laser Focus為medium;步長為100 μm。數據處理使用FlexImaging 5.0軟件(Bruker Daltonics)

實驗結果

圖3 質譜數據圖



圖4 部分脂質分子成像圖

實驗方案

采用Matrix Builder基質噴涂儀,納米顆粒TiO2基質(100nm,10 mg/mL DHB,溶劑:乙腈/水=8/2),布魯克MALDI-FTICR MSI質譜進行實驗。

實驗方案設計

具體參數如下:

TiO2基質2mg/mL溶于甲醇溶液基質噴涂儀實驗參數如下:循環次數為20次;泵速為0.08 mL/min;掃描間距為2 mm;噴嘴溫度為 50℃;噴霧壓力為0.6 MPa;干燥時間為8 s;噴霧電壓為 0 V;基質濃度為2mg/mL;噴嘴速度為 30 mm/s;掃描方式為橫向掃描;載波臺溫度為45℃;保持時間為30 s;噴嘴高度為12 mm。

實驗結果

圖5  TiO2對鼠腦解析的總離子流圖



圖6  TiO2對鼠腦解析的分子成像圖

數據來源:

(1)Anal. Chem. 2015, 87, 12, 5860–5865

(2)維科托基質噴涂應用支撐實驗室。

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